DNA sirkuler adalah salah satu susunan konformasi dari DNA di mana ia mencapai struktur tertutup. DNA sirkular tidak memiliki ujung yang berbeda. DNA sirkuler ditemukan di hampir semua prokariota dengan beberapa pengecualian, di mitokondria dan kloroplas dari eukariota dan plasmid. DNA sirkuler terletak di sitoplasma sel prokariota. DNA sirkuler dapat eksis dalam berbagai bentuk termasuk bentuk superkoil dan bentuk DNA sirkuler sobek. Ketika DNA sirkuler diisolasi dan dipisahkan oleh elektroforesis gel agarosa, berbagai bentuk DNA sirkuler dapat menunjukkan sifat migrasi yang berbeda pada gel.

DNA plasmid juga disebut sebagai DNA sirkuler ekstrachromosomal yang ada di beberapa mikroorganisme telah terbukti memiliki manfaat besar di bidang biologi molekuler dan rekayasa genetika. Plasmid disintesis secara komersial dan digunakan sebagai vektor dalam kloning molekuler. Beberapa contoh vektor plasmid adalah pBR322, pUC18.

Replikasi DNA sirkular sangat bervariasi dibandingkan dengan DNA linier. Selama proses replikasi, hanya satu asal replikasi hadir, dan karena sifatnya yang melingkar, replikasi dapat berlangsung secara searah dengan pembentukan garpu replikasi tunggal.